GBZ_T 254-2014 尿中苯巯基尿酸的高效液相色谱测定方法
|
ID： |
F5C4777C3DA342A08908F29992044F41 |
|
文件大小(MB)： |
0.64 |
|
页数： |
7 |
|
文件格式： |
|
|
日期： |
2024-8-13 |
|
购买： |
文本摘录（文本识别可能有误，但文件阅览显示及打印正常，pdf文件可进行文字搜索定位）：
ICS 13.100,C 52 GBZ,中华人民共和国国家职业卫生标准,GBZ/T 254—2014,尿中苯統基尿酸的高效液相色谱测定方法,Determination of S-phenylmercapturic acid in urine by high performance,liquid chromatogrphy,2014-07-23 发布2014-12-15 实施,中华人民共和国,国家卫生和计划生育委员会,GBZ/T 254—2014,1/. —i—,刖 a,根据《中华人民共和国职业病防治法》制定本标准,本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草,本标准起草单位和主要起草人:,——本标准第3章尿中苯筑基尿酸的高效液相色谱方法:,主要起草单位:武汉科技大学医学院、湖北中医药大学、鄂州市疾病预防控制中心,主要起草人:宋世震、梅勇、叶玉杰、胡霞敏、叶方立、陈斯琪、姚群峰、谢云、吴三明,一本标准第4章尿中苯端基尿酸的高效液相色谱ー质谱方法:,主要起草单位：武汉科技大学医学院、武汉大学化学学院、湖北中医药大学,主要起草人:宋世震、梅勇、叶玉杰、胡霞敏、叶方立、余琼卫、孙丹陵,I,GBZ/T 254—2014,尿中苯統基尿酸的高效液相色谱测定方法,1范围,本标准规定了尿中苯統基尿酸浓度的检测方法,本标准适用于职业接触苯作业工人尿中苯統基尿酸浓度的测定,2规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件,GBZ/T 173职业卫生生物监测质量保证规范,GBZ/T 210.5生物材料中化学物质的测定方法 第5部分:生物材料中化学物质的测定方法,WS/T 97尿中肌肝分光光度测定方法,3尿中苯統基尿酸的高效液相色谱法,3.1 原理,尿中苯琉基尿酸(S-phenylmercapturic acid, SPMA)经萃取后,经十八烷基硅烷键合硅胶柱(Octadecy,lsilyl,ODS)柱分离,紫外检测器检测,以SPMA峰保留时间定性,峰高或峰面积定量,3.2 仪器,3.2.1 高效液相色谱仪,紫外检测器,仪器操作参考条件:,a) 色谱柱:。DS(150 mmX4.6 mm,5 Rm)；,b) 保护柱:。DS(1。mmX4.6 mm,5 km)；,c)流动相：A相:乙睛;B相:乙睛100 mL,甲醇24 mL,用0.5%三乙胺水溶液(用磷酸调pH =,2.16)定容至1 000 mL;梯度洗脱:〇 min.34 min用10〇%B相,34 min.41 min用A相:B相,(10 ： 90) ,41 min.49 min 用 10〇%B 相;流速:2.0 mL/ min；,d)柱温:35℃；,e)进样量:20 ptL；,f) 检测波长:2O5nm,3.2.2 分光光度计,3.2.3 聚氯乙烯塑料瓶：100 mL,3.2.4 离心机:〇 r/min.5 000 r/min,3.2.5 具塞离心管:10 mL、15 mL,3.2.6 微量注射器:25 rL,1,GBZ/T 254—2014,3.3 试剂,3.3.1 肌肝测定试剂盒（苦味酸分光光度法）,3.3.2 水,双蒸水,3.3.3 磷酸,分析纯,3.3.4 乙月青,色谱纯,3.3.5 甲醇,色谱纯,3.3.6 盐酸,分析纯,3.3.7 硫酸溶液,50%（体积分数）,3.3.8 氢氧化钾（分析纯）溶液，7.8 mol/L,3.3.9 萃取液,氯仿:异丙醇=5 ：1（体积比）,3.3.10 氮气（＞95%）,3.3.11 标准溶液:精密称取40 mg SPMA标准品置于100 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度,充分摇匀,此溶液为400 mg/LSPMA贮备液,于4 ℃保存备用,可保存期限30 d,临用前用甲醇稀释到,所需浓度的标准溶液;或用国家认可的标准溶液配制,3.4 样品的采集、运输和保存,用聚乙烯塑料瓶收集接触苯作业的工人班后尿50 mL,按100 ： 1的体积比例加入盐酸;另留取,5 mL不加酸尿置于试管用作尿中肌酊测定。尿样采集后,最好在48 h内检测。若需保存尿样,在4 ℃,条件下可保存2周,在ー20 ℃冰箱冷冻可保存4个月,3.5 分析步骤,3.5.1 按WS/T 97尽快测定尿中肌肝浓度,3.5.2 样品处理:分析时将尿样从冰箱取出于室温下解冻,取约5.0 mL尿样于10 mL具塞离心管中,5 000 r/min离心15 min,取上清液2.0 mL于!5 mL具塞离心管中,加入2.0 mL水，涡旋约15 s,加,0.8 mL硫酸溶液,涡旋约30 s,10 min内加入0.8 mL氢氧化钾溶液，涡旋约30 s,加入5.0 mL萃取液,盖紧磨口盖,在涡旋混合器上涡旋约50 s,4 000 r/min离心!0 min,分层清晰后，保留有机相,将上层水,相转移至另ー 15 mL离心管中,再加入5.0 mL萃取液进行第二次萃取,合并两次萃取液,水浴50 ℃氮,气流下挥干,残渣用100 kL甲醇涡旋溶解,5 000 r/min离心!0 min,取20 ML甲醇上清液进样测定,3.5.3 标准曲线绘制：用甲醇稀释标准溶液成。.0 kg/L.1 000 fzg/L苯疏基尿酸标准系列。参照仪器,操作条件,将液相色谱仪调节至最佳测定状态,进样20日レ测定各标准系列。每个浓度重复测定3次,由测得的峰高或峰面积均值对相应的苯筑基尿酸浓度（kg/L）绘制标准曲线或计算回归方程,3.5.4 样品测定：用测定标准系列……
……